欢迎光临张jia港沙巴体yu开hu机械制zao有限gong司 收藏本zhan 联系沙巴体yu开hu   |网zhan地图
当前位置:shou页 > 新闻资xun > 行业新闻 >

新闻资xun

NEWS

gong司动态
行业新闻
chang见问题

s10英雄联盟下注平台

CONTACT?US

??手机

133-3867-9591

联系ren:张勇

固话:0512--58645572

邮编:215623

传zhen:0512-58645573

邮箱:zy@zjgstyjx.com

邮箱:service@zjgstyjx.com

??gong司地址

张jia港shichang阴沙管理区乐红路45号

行业新闻

s10英雄联盟下注平台

s10英雄联盟下注平台

制备型超高速离心机的几种fen离方法:
A.cha速离心:逐次增加离心li,每次可沉降样品溶液中的yi些组份。 
cha速离心是yi种最chang用的方法。在这种方法中,离心管在开shi时装满了均yi的样品溶液。通过在yi定速度下yi定时间的离心hou,就可得到两个部份:沉淀和上清液。
通chang在第yi次离心时把大部fen不xuyao的大粒子沉降去掉。这时所xu的组份大部fen仍留在上清液謝iaoH籬ou将收ji到的上清液以更高速度离心,把所xu的粒子沉积下lai。离心的时间yaoxuan择得当,使大部份不xuyao的更xiao的粒子仍留在上清液謝iao6杂诘玫降某恋砗蜕锨逡嚎梢越薪鴜i步的离心,直到da到所xuyao的fen离纯度为zhi。
cha速离心的特dian是cao作简单,但fen离纯度不高。
B.mi度梯度离心法:可以同时使样苀en屑父龌蛉孔榉輋en离,具有hen好的fen辨率。 
1)速率区带法(rate zonal):
根据样苀en胁煌W铀哂械牟煌某叽绱髕iao及沉降速度(S)。大致步骤如下:
在离心管中装入mi度梯度溶液,溶液的mi度cong离心管顶部至底部逐渐增加(正梯度)。
将所xufen离的样品xiao心地加至mi度梯度溶液的顶部。样品在梯度溶液表面xing成yi负梯度。
由于不同大xiao的粒子在离心li作用下,在梯度中yi动的速度不yi样,所以经过离心houhuixing成几条fen开的样品区带。
注yi:样品粒子的mi度bi须大于梯度液注中任yidian的mi度。离心过chengbi须在区带到da管子底部前停zhi。
2)等mi度离心法(isopycnic):
根据粒子的不同mi度laifen离。离心过cheng中,粒子huiyi至与它本shenmi度相同的地方xing成区带。
mi度样度的xuan择yao使梯度的fan围bao括所有待fen离粒子的mi度。样品可以在mi度梯度液粒上面或均匀fen布在mi度梯度謝iao>胄膆ou,样品粒子da到它们的ping衡dian。
注yi:ping衡hou粒子的fen离完全由其mi度决定,与时间无关,此时zai改变离心转速,只能改变区带的相对位置。
2.mi度梯度fen析法
1)梯度jie謘hi灾视離uan择:
A、ying具备的性质 :
梯度物质的xuan择yuan则是满足fen离方法的ji本yao求,yi个理想的mi度cai料biao准它ying是:
所xing成的溶液mi度yingbao括所xuyao的mi度fan围。
具有某些性质,如折射率,据此可测定它的nong度。
所xing成的溶液zhan度di。
不损shang所fen离的样品。
离心fen离hou容yi除去。
不妨碍fen离积fen的fen析。
B、chang用jie质种类:
表yi、chang用梯度cai料在20℃mi度
B.梯度jie质ying用fan围:
表二、等mi度梯度jie质的ying用
表三、各种大fen子在zhe糖梯度液中的大约mi度
(2)、梯度溶液的准备:
计算
稀释
(3)、梯度xing状
梯度xing状fene咝汀⒌ren傩汀⒔滋菪汀ingtan型、秅ai托蛕hi数梯度。
梯度xing状对于fen离是否成功非chang重yao:
最chang用的是xian型梯度,shi用于fen离蛋白质、mei、ji素、核糖体亚ji和yi些植物bing毒;祌en傩蛃hi用于fen离脂蛋白和yi些xu上浮fen离样品;不连xu或阶梯型梯度最shi用于fen离整细胞、亚细胞组fen以及纯化yi些哺乳类动物bing毒或昆虫bing毒。祌en偬荻纫约俺ひ褐稍鼋鴉en离能li,shi用于fen离核糖体亚ji、多核糖体及植物bing毒。
B.梯度柱制备:
梯度液柱可以用蕑hiせ蛱荻葃i制备
ban注法:
为suo减离心时间,或fen离样品较少可用ban注法e耣an管铺置梯度jie质,中间加样品,上面铺Buffer或液体石腊油。
(4)、加样方法与加样liang:
将样品加到梯度液柱上,针尖和离心管成45-60°角度,慢慢地将样品沿管壁流到液面上去,对于DNAyi类yi断的脆ruo样品,ying该用孔径较大的yi液管代替针头,以避免剪qieli对样品的qie割作用。样品nong度是梯度柱最xiaomi度的1/10(W/W)。
(5)、转子的xuan择与xiaoying:
(6)、fen离区带的hui收及检测
离心hou所xing成的区带样品的hui收方法ji本有si种:
a.穿刺法
穿刺离心管底部,使梯度溶液di出,将yi具有heshi阀门的gaimao放在离心管顶,可控制di出速度。
b.虹吸法:
将yi毛细管轻轻插入管底,尽liang防zhi梯度抖动,用微liang泵逐渐di取,以yi定liangdi数或体积部fen收取。
c.加压法:
通过yi针管将高mi度的液体泵入到梯度离心管的底部,部fen收ji换出的溶液。
d.qie割法:
cai用专用的qie割刀qie割所xu区带。
区带检测:
所谓区带检测,实际上是对水ping转子或角转子和chui直转子离心管中的fen离物质所做的监测,通chang只是测liang在260或280mm时长的吸收值,以决定梯度中的核酸或蛋白的整个fen布,这个cao作通chang称之为在xian(on line)监测。

关于沙巴体yu开hu gong司wen化 沙巴体yu开hu中心 技术提供 过cheng控制 新闻资xun gong司动态 联系沙巴体yu开hu

友情链接: 全zi动离心机 | 卧式离心机yuan理 | 蒙gubao | 蒙gubao | 仿木栏gan | 全zi动离心机 | 锤liao | he肥qiao架厂 | luo茨feng机生产厂jia | 专业高压电源维修 | 卧式离心机型号 | 无锡不锈钢板 | 动ping衡机 | 通feng管道 | 燃气发电机组 | 发电机组配件 | ??

地址:张jia港shichang阴沙管理区乐红路45号 ??????备an号:苏ICP备17074686号

?

在xianzi询

Online Consulting

在xian客服 ?QQ客服1?QQ客服2

?zi询热xian

133-3867-9591